一、 引言

PCR是聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction)的簡(jiǎn)稱，是在短時(shí)間內(nèi)體外大量擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。自動(dòng)完成聚合酶鏈反應(yīng)，提供DNA 擴(kuò)增的溫度條件而設(shè)計(jì)的儀器稱為PCR儀。

PCR儀主要用于DNA片段的放大，可將DNA分子或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍，在這過(guò)程中主要是3個(gè)特征溫度循環(huán)：

1． 高溫變性：把樣品加熱至90～95℃讓DNA模板變性變成單鏈。

2． 低溫退火：讓樣品的溫度迅速下降至50～65℃,引物就可以結(jié)合到模板上去。

3． 適溫延伸：讓樣品的溫度上升至70～75℃,DNA聚合酶就可以從引物開(kāi)始用底物復(fù)制出新鏈。

因此，在PCR反應(yīng)過(guò)程中對(duì)溫度控制的要求很高，良好的溫度控制是PCR儀質(zhì)量好壞的關(guān)鍵。

二、PCR基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)的現(xiàn)狀

PCR儀的控溫精度、升降溫速率以及溫場(chǎng)的均勻性等直接影響DNA片段擴(kuò)增的結(jié)果。PCR儀經(jīng)使用后，其溫度傳感器的計(jì)量特性會(huì)發(fā)生變化，作為計(jì)量設(shè)備一般須經(jīng)定期校準(zhǔn)后方能繼續(xù)使用。

幾乎進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室（如基因判別、親子鑒定、DNA個(gè)體識(shí)別）都會(huì)使用多臺(tái)擴(kuò)增儀以滿足實(shí)驗(yàn)需求。而且，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的基因擴(kuò)增儀都是常開(kāi)常用，使用頻率高，很難保證其性能指標(biāo)符合實(shí)驗(yàn)要求。各實(shí)驗(yàn)室對(duì)PCR儀的質(zhì)量控制還停留在自檢自校和依賴于廠商的售后支持。

三、 PCR儀溫度校準(zhǔn)的項(xiàng)目及必要性

一個(gè)穩(wěn)定的溫度循環(huán)是成功實(shí)現(xiàn)PCR所必需的。其中溫度控制的動(dòng)、穩(wěn)態(tài)特性是影響PCR擴(kuò)增結(jié)果正確與否的最重要因素之一, 這包括溫度準(zhǔn)確性、升降溫速度、溫場(chǎng)均勻性。

方案特點(diǎn)

1.     多路檢測(cè)，高速采集。系統(tǒng)配備高精度測(cè)溫儀1611A，多通路溫度檢測(cè)，采集速度可達(dá)10ms/通道，超高速數(shù)據(jù)采集提高校準(zhǔn)效率

2.     測(cè)溫探頭 高精度高貼合性。探頭采用鍍金工藝，響應(yīng)速度快，長(zhǎng)期穩(wěn)定性佳，符合ITS-90國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，均可溯源，滿足規(guī)程JJF1527-2015校準(zhǔn)規(guī)范的0.1℃精度要求；測(cè)溫探頭外型貼合PCR反應(yīng)孔，尺寸誤差小于1mm，保證測(cè)量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度

3.     軟排線出線方式靈活，適用多種PCR儀；在工藝上也進(jìn)行了升級(jí)，寬度更窄，更不易折損，延長(zhǎng)了使用壽命

4.     有強(qiáng)大的數(shù)據(jù)采集與分析軟件支持。實(shí)時(shí)記錄數(shù)據(jù)，自動(dòng)生成校準(zhǔn)報(bào)告，和趨勢(shì)繪圖，滿足校準(zhǔn)規(guī)范，支持對(duì)各溫度指標(biāo)的自動(dòng)計(jì)算

5.     雙供電方式提升使用便捷度。測(cè)溫儀支持充電和插電兩種供電方式，現(xiàn)場(chǎng)使用更便捷

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