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塑料培養(yǎng)皿全解析:細胞培養(yǎng)實驗中的選擇、操作與注意事項

來源:本生(天津)健康科技有限公司   2025年06月19日 09:22  

  塑料培養(yǎng)皿全解析:細胞培養(yǎng)實驗中的選擇、操作與注意事項?

  以下是塑料培養(yǎng)皿的正確使用方法指南,綜合實驗室操作規(guī)范與注意事項:

  一、使用前準備?

  規(guī)格選擇?

  35mm?:適合小規(guī)模實驗(如干細胞克隆),培養(yǎng)基用量2-3ml。

  60mm?:通用型,培養(yǎng)基4-5ml,適用于常規(guī)細胞傳代。

  100mm/150mm?:需大量擴增細胞時使用,培養(yǎng)基8-10ml,注意開口大易污染。

  拆封與檢查?

  一次性塑料培養(yǎng)皿通常預滅菌(γ射線或EO),拆封前確認包裝完好。

  檢查表面是否平整無裂紋,避免影響細胞貼附。

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  二、操作步驟?

  無菌操作?

  超凈臺內(nèi)酒精擦拭臺面及手套,避免手部接觸皿內(nèi)壁。

  開蓋時短暫灼燒皿口(若使用酒精燈),減少空氣污染。

  培養(yǎng)基與細胞接種?

  貼壁細胞:接種密度建議5×10?~1×10? cells/cm2,搖勻時采用“十字法”混勻。

  懸浮細胞:選擇低吸附處理培養(yǎng)皿,減少細胞損失。

  培養(yǎng)環(huán)境控制?

  CO?培養(yǎng)箱中倒置皿蓋,防止冷凝水滴落干擾細胞生長。

  保持水平放置,避免培養(yǎng)基分布不均。

  三、使用后處理?

  廢棄規(guī)范?

  接觸生物樣本的培養(yǎng)皿需按生物廢物處理,不可隨意丟棄。

  未污染的塑料皿可高溫高壓滅菌(需確認材質(zhì)耐溫性)后丟棄。

  重復使用(僅限可滅菌型)?

  耐高溫PP材質(zhì)可121℃高壓滅菌15分鐘。

  普通PS材質(zhì)建議化學消毒(如75%酒精浸泡30分鐘)。

  四、常見問題解決?

  細胞貼附差?:檢查是否誤用未TC處理的培養(yǎng)皿,或包被步驟失效。

  邊緣干涸?:培養(yǎng)箱濕度不足時,可在周圍放置無菌水盤。

  污染跡象?:立即終止實驗,并對操作環(huán)境消毒。

  五、注意事項?

  避免高溫變形?:PS材質(zhì)培養(yǎng)皿不可高壓滅菌或高溫烘干。

  觀察記錄?:選擇高透明度培養(yǎng)皿,便于直接顯微鏡觀察。

  分裝保存?:未使用的皿條需密封防潮,避免長時間暴露。

  如需特定滅菌參數(shù)或細胞類型適配建議,請參考產(chǎn)品說明書。

  注:以上資料僅供參考,如需特定品牌或滅菌參數(shù),請參考產(chǎn)品說明書或是咨詢供應品牌商。

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