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ELISA試劑盒組織勻漿液的細節(jié)處理及使用原則

來源:天津天正信達生物科技有限公司   2025年06月26日 11:29  

  ELISA試劑盒組織勻漿液的細節(jié)處理及使用原則


  以下是天正信達ELISA試劑盒組織勻漿液的細節(jié)處理及使用原則的綜合指南,基于最新實驗規(guī)范整理:

  一、組織勻漿液制備關鍵步驟

  樣本預處理?

  用預冷PBS(0.01M, pH 7.4)沖洗組織,清除表面血液和雜質(zhì)

  去除筋膜/脂肪等冗余組織,避免非特異性干擾

  勻漿比例控制?

  推薦組織與緩沖液重量體積比1:5~1:9(如1g組織加5-9mL PBS)

  需記錄實際比例以便數(shù)據(jù)校正

  裂解方法選擇?

  機械勻漿?:冰浴條件下使用玻璃勻漿器研磨至糜狀

  超聲輔助?:功率200W超聲3-5秒/次(冰浴間歇操作)

  凍融循環(huán)?:限2次以內(nèi)(-80℃冷凍→室溫解凍)

  離心參數(shù)?

  4℃ 5000×g離心5-10分鐘取上清

  肝/腦等特殊組織需16000×g離心30分鐘


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  二、緩沖液配置原則

  基礎緩沖液?

  推薦含蛋白酶抑制劑的預冷PBS(pH 7.2-7.4)

  特殊樣本需添加:

  • 1% Triton X-100(膜蛋白提取)

  • 200μM PMSF(絲氨酸蛋白酶抑制)

  抑制劑使用?

  臨用前加入抑制劑混合物(1:100比例)

  避免含NaN3的緩沖液(抑制HRP活性)

  三、保存與質(zhì)控要求

  分裝存儲?

  短期:4℃保存≤1周

  長期:-80℃分裝(避免反復凍融)

  使用前處理?

  室溫緩慢復融(禁止加熱)

  再次離心去除沉淀物

  質(zhì)控指標?

  蛋白濃度建議0.5-2mg/mL

  溶血樣本需檢測血紅蛋白干擾(OD414nm<0.2)

  四、洗液使用規(guī)范

  匹配原則?

  優(yōu)先使用原裝配套洗液

  禁止混用不同廠家/批號洗液

  替代方案?

  緊急情況下可用同項目其他品牌洗液

  需驗證pH(7.2-7.6)和導電率

  注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

  天津天正信達供應:RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業(yè)人員的研發(fā)、構建了儀器設備齊全的實驗技術平臺,主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。

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