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【試劑簡述】
腔腸素h(Coelenterazine h),天然腔腸素的去羥基衍生物,是海腎熒光素酶(Rluc)的作用底物,也是水母發(fā)光蛋白的輔因子,其發(fā)光強度比天然腔腸素高10倍以上,適用于報告基因分析。也是水母發(fā)光蛋白的輔助因子。
腔腸素h可用于檢測活細(xì)胞中鈣離子濃度,基因報告分析,BRET(生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移)研究,ELISA,HTS,以及組織或細(xì)胞中ROS水平的化學(xué)發(fā)光檢測。
【試劑信息】
中文名稱:腔腸素h
英文名稱:Coelenterazine h
CAS號:50909-86-9
純度:95%+
分子量:407.46
分子式:C26H21N3O2
外觀:固體
供應(yīng)商:西安凱新生物科技有限公司
規(guī)格:1g、5g、10g
結(jié)構(gòu)式:
溶解性:溶于部分有機(jī)溶劑以及水
外觀:根據(jù)分子量決定,固體或者液體
儲存條件:-20℃以下冰凍、干燥
【細(xì)胞染色方法】
(1)用 BRAC 或 G5A 轉(zhuǎn)染 Hela 細(xì)胞。
(2)將 10 µM Coelenterazine h 加入細(xì)胞板。
(3)將染料加樣板放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時 (根據(jù)實驗優(yōu)化)。
(4)熒光顯微鏡檢測 (Ex/Em = 437/466 nm)。Coelenterazine h (1-10 μM) 可用作 RLuc8 的發(fā)光底物。
(5)在BRAC 的 Ca2+ 結(jié)合動力學(xué)測量中,將5 nM BRAC 蛋白與20μM
(6)Coelenterazine h 在不同濃度的Ca2+ 緩沖液中快速混合后,在1 kHz下監(jiān)測 BRAC 的 Venus (530 nm) 發(fā)射強度。
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該試劑僅用于科研實驗,不可用于人體
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