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如何判斷培養(yǎng)皿已污染?

來源:天津天正信達(dá)生物科技有限公司   2025年07月17日 15:52  

  

  判斷培養(yǎng)皿是否被污染需結(jié)合肉眼觀察、顯微鏡檢查和培養(yǎng)特征綜合分析,以下是具體判別方法及處理建議:

  一、肉眼觀察特征

  培養(yǎng)基異常變化?

  渾濁或沉淀?:細(xì)菌污染時(shí),培養(yǎng)基通常在4-6小時(shí)內(nèi)變渾濁,震蕩后出現(xiàn)云霧狀懸浮物(如細(xì)沙狀沉淀)?。

  顏色改變?:細(xì)菌污染會(huì)導(dǎo)致pH下降,培養(yǎng)基由紅變黃;真菌污染則可能保持清亮但出現(xiàn)白色/黃色漂浮物(如霉菌團(tuán)塊)?。

  異味?:嚴(yán)重細(xì)菌污染可能散發(fā)腐敗氣味?。

  菌落形態(tài)?

  細(xì)菌污染后期可見密集小菌落,真菌污染則表現(xiàn)為絨毛狀或顆粒狀菌團(tuán)?。

  二、顯微鏡檢查

  細(xì)菌污染?

  低倍鏡下可見黑色細(xì)沙狀顆粒布滿視野,高倍鏡下可見桿狀或球狀細(xì)菌游動(dòng)?。

  細(xì)胞形態(tài)異常:貼壁細(xì)胞變圓、脫壁,胞內(nèi)出現(xiàn)空泡?。

  真菌污染?

  酵母菌呈卵圓形,霉菌表現(xiàn)為絲狀、樹枝狀結(jié)構(gòu)?。

  支原體污染?

  背景出現(xiàn)小黑點(diǎn),細(xì)胞生長緩慢但培養(yǎng)基不渾濁,DAPI染色可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)綠色熒光點(diǎn)?。

  三、培養(yǎng)行為輔助判斷

  生長速度異常?

  細(xì)菌污染爆發(fā)快(24小時(shí)內(nèi)),支原體污染則進(jìn)展緩慢(數(shù)周)?。

  霉菌污染初期細(xì)胞仍可生長,但后期停滯?。

  對照實(shí)驗(yàn)?

  接種無菌平板:若懷疑污染,可將培養(yǎng)液涂布至新平板,觀察是否形成菌落?。

  培養(yǎng)基對照:每批培養(yǎng)皿需設(shè)陰性對照,排除培養(yǎng)基自身污染?。

  四、污染類型與處理建議

  污染類型 關(guān)鍵特征 處理方式

  細(xì)菌? 培養(yǎng)基渾濁、pH驟降 雙抗處理無效則廢棄,消毒環(huán)境?

  真菌? 白色絮狀物、絲狀結(jié)構(gòu) 直接丟棄,用兩性霉素B或硫酸銅消毒?

  支原體? 小黑點(diǎn)、細(xì)胞狀態(tài)差 使用支原體清除劑或丟棄?

  預(yù)防措施?:嚴(yán)格無菌操作,定期清潔培養(yǎng)箱(酒精+紫外消毒),更換培養(yǎng)基前檢查血清質(zhì)量?。

  若污染無法確認(rèn),建議重復(fù)實(shí)驗(yàn)或聯(lián)系專業(yè)檢測機(jī)構(gòu)?。

  注:以上資料僅供參考,完整操作請以實(shí)說明為準(zhǔn),不同品牌可能存在細(xì)節(jié)差異?。

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