柱孢藻毒素檢測試劑盒-美國ABRaxis；ELISA 試劑盒用戶操作指南【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！齊一生物： ；

柱孢藻毒素檢測試劑盒-美國ABRaxis試劑盒特點 
1.AP單克隆抗體特異地與AP結(jié)合，和其它結(jié)構(gòu)相類似的化學物質(zhì)不發(fā)生交叉反應(yīng)。單克隆抗體質(zhì)量穩(wěn)定每批次見幾乎沒有變化。
2.檢測范圍5μg/L - 500μg/L (ppb) 。通過固相萃取濃縮可以檢測更低的濃度。
3.這個試劑盒有很高的重復性，變異系數(shù)在10%之內(nèi)。
4.操作簡單，整個過程僅花費2.5小時
5.試劑盒的形式是96孔微孔板，可以同時檢測多個樣品，花費合理。
檢測原理 （競爭ELISA）
1. 競爭性反應(yīng) 
這個檢測方法依靠單克隆抗體來識別AP。樣品中的AP和一個AP-酶結(jié)合物預先混合然后加入到每個微孔中競爭包被在微孔表面的特異性抗體。樣品中AP的濃度如果高于AP-酶結(jié)合物，AP將主要與抗體結(jié)合。反之樣品中AP的濃度如果低于于AP-酶結(jié)合物，AP-酶結(jié)合物將主要與抗體結(jié)合。
2. 顯色反應(yīng) 
通過洗滌步驟去除沒有反應(yīng)的AP和過多的AP-酶結(jié)合物。通過加入底物來檢測AP。和微孔板中抗體結(jié)合的AP-酶結(jié)合物催化底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)。通過一個孵育期用稀酸終止反應(yīng)。樣品中AP的濃度越高導致結(jié)合到微孔板抗體上的AP-酶結(jié)合物越少，從而產(chǎn)生的顏色越淡，吸光度越低。
3. 定量分析 
利用已知濃度的AP標準的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應(yīng)曲線（標準曲線）。把樣品的吸光度值用內(nèi)插法插入到標準曲線中可以精確的計算出樣品中AP的濃度。
AP 檢測流程
1.樣品處理
在操作前半小時從冰箱中拿出試劑盒使其恢復到室溫（18-25°C）。過濾樣品，加入甲醇和DMSO使甲醇的zui終濃度為10% (v/v),DMSO的zui終濃度為1%(v/v)。對于一些樣品進行固相萃取是必要的。
2. 標準溶液
利用甲醇溶液（甲醇：水 0.8：8.2）把AP標準濃縮液稀釋10倍。然后對此溶液進一步稀釋成設(shè)定的AP標準的濃度（5μg/L- 500μg/L）。在配制的時候先加甲醇溶液后加標準。
3. 抗原-酶結(jié)合物溶液
重新配制一瓶抗原-酶結(jié)合物溶液：抗原-酶結(jié)合物粉末(#3) + 緩沖液(#4, 白蓋).
4. 標準/樣品 與結(jié)合物混合
在沒有包被的微孔板中(#8)混合100μL AP標準（或樣品）和100μL酶結(jié)合物溶液。先加結(jié)合物后加標準或樣品。
5. 競爭反應(yīng)
在包被抗體的微孔板(#1)的每個孔中加入100μL在第四步中混合的溶液，在室溫(18-25°C)孵育60分鐘。
6. 洗液
用蒸餾水以1：5的比例稀釋洗液（6倍濃縮）：1ml 洗液(#5) + 5ml蒸餾水 
7. 沒有結(jié)合的物質(zhì)
每個微孔用300μL的洗液沖洗，并重復兩次。在吸水紙上用力的排板出去微孔中的液體。
8. 顯色
每個微孔加入100μL顯色試劑(#6, 棕色瓶)，在室溫(18-25°C)孵育30分鐘。然后加入每孔再100μL的終止液(#7, 黑蓋)終止反應(yīng)。
10. 定量
在450nm測定每個標準的吸光度值制作標準曲線。利用內(nèi)插法把樣品的吸光度值代入標準曲線計算樣品中AP的含量。

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