【參數(shù)信息】
英文名稱:Liproxstatin-1
CAS NO:950455-15-9
分子式:C19H21ClN4
分子量:340.85
狀態(tài):固體
溶解性: 溶于DMSO、乙醇、DMF
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【Liproxstatin-1作用機(jī)制】
鐵死亡的核心機(jī)制
核心特征:鐵依賴性脂質(zhì)過(guò)氧化驅(qū)動(dòng)的程序性細(xì)胞死亡,伴隨活性氧積累、線粒體嵴消失、細(xì)胞膜破裂。
關(guān)鍵調(diào)控通路:
GPX4通路:gu胱甘肽過(guò)氧化物酶4(GPX4)依賴gu胱甘肽(GSH)還原脂質(zhì)過(guò)氧化物,抑制鐵死亡;其失活直接誘發(fā)鐵死亡。
鐵代謝通路:Fe2+通過(guò)芬頓反應(yīng)催化脂質(zhì)過(guò)氧化,鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(如DMT1)和儲(chǔ)存蛋白失衡導(dǎo)致鐵超載。
脂代謝通路:多不飽和脂肪酸(PUFA)磷脂在脂氧合酶(LOXs)或POR酶催化下氧化,生成毒性脂質(zhì)過(guò)氧化物。
線粒體途徑:線粒體ROS加劇脂質(zhì)過(guò)氧化,VDAC通道異常開放促進(jìn)鐵死亡。
簡(jiǎn)言之,鐵死亡是鐵-脂質(zhì)過(guò)氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。
【實(shí)驗(yàn)使用方法】
(一)溶液配制
儲(chǔ)備液配制:
推薦濃度:10 mM(例:1 mg粉末 + 293.4 μL DMSO)。
分裝建議:配制后分裝至無(wú)菌管,-80℃保存≤6個(gè)月,避免反復(fù)凍融。
工作液稀釋:
細(xì)胞實(shí)驗(yàn):用培養(yǎng)基稀釋儲(chǔ)備液,終濃度DMSO<0.3% 。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn):生理鹽水稀釋,DMSO終濃度<5%。
(二)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
適用模型:
Gpx4基因敲除細(xì)胞、人近端腎小管上皮細(xì)胞、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞等。
濃度與處理:
基礎(chǔ)抑制:50 nM(阻斷脂質(zhì)過(guò)氧化)。
對(duì)抗誘導(dǎo)劑:200 nM可逆轉(zhuǎn)Erastin(1 μM)、RSL3(0.5 μM)誘導(dǎo)的鐵死亡。
預(yù)處理時(shí)間:先加抑制劑30-60分鐘,再加入鐵死亡誘導(dǎo)劑。
【相關(guān)試劑】
iFluor594 Phalloidin
APC-Streptavidin
PE-Cy7標(biāo)記鏈霉親和素
Kanamycin Sulfate
Rifampicin, USP Grade
Ampicillin, Sodium Salt
Fluo-3,AM,Cell Permeant
Cal-590 AM,Cell Permeant
Carbenicillin, Disodium Salt
Chloramphenicol, USP Grade
BL21 Star (DE3) Competent Cell
BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell
Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell
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